Role of the glycoprotein Spike S1 of the SARS-CoV-2 virus on the function of hemichannels formed by Cx43
Loading...
Date
2022
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Introducción: El virus SARS-CoV-2 causante de la pandemia COVID-19 ha generado una crisis sanitaria mundial. A pesar del rápido desarrollo de vacunas contra el COVID-19, los mecanismos moleculares que subyacen a la infección por el SARS-CoV-2 y su impacto en la fisiología celular siguen siendo objeto de investigación. Un aspecto incierto es si el daño celular inducido por el COVID-19 se debe al SARS-CoV-2 per se, sus proteínas víricas (en particular la proteína de espiga S1 [spike S1]), y/o la inflamación sistémica inducida por la infección. Estudios anteriores indican que la activación de los hemicanales es crucial para la replicación viral y el daño celular evocado por diversas proteínas virales. Los hemicanales abarcan una familia de canales de la membrana plasmática que permiten el intercambio iónico y molecular entre el citosol y el espacio extracelular. De manera relevante, la apertura persistente de estos canales ha sido asociado a la patogénesis de diferentes enfermedades. Sin embargo, se desconoce si la proteína spike S1 afecta a la actividad de los hemicanales. Materiales y Métodos: Células HeLa transfectadas con la conexina-43 GFP (HeLa-Cx43GFP), o con la Cx43GFP más la enzima convertidora de la angiotensina 2 m Cherry (HeLa-Cx43GFP/ACE2mCherry) fueron tratadas durante 1-72 h con spike S1 (10-1000 pM). Luego se midió la actividad de los hemicanales mediante experimentos de captación de colorante y registros de fluorescencia en tiempo real por microscopia de epifluorescencia. Resultados: Spike S1 aumentó significativamente la captación de colorante en las células HeLa-Cx43GFP, fenómeno que se potenció en las células Cx43GFP/ACE2mCherry. Dos bloqueadores específicos de los hemicanales de Cx43 (Tat-L2 y gap19) suprimieron completamente estas respuestas y tampoco se observaron en las células HeLa parentales. Discusión: Se propone que la apertura persistente de los hemicanales de Cx43 podría contribuir al daño celular causado por el SARS-CoV-2. En este sentido, estos canales podrían ser un nuevo blanco terapéutico para hacer frente al cuadro clínico generado por el COVID prolongado o “Long-COVID”.
Description
Tesis (Magíster en Investigación en Ciencias de la Salud)--Pontificia Universidad Católica de Chile, 2022
Keywords
Cx43 hemichannels, Connexin, SARS-CoV-2, COVID-19, Spike protein