Galectin-9 promotes an immune-suppresive microenvironment in gastric cancer
| dc.contributor.advisor | Owen, Gareth Ivor | |
| dc.contributor.author | Hill Machado, Charlotte Nicole | |
| dc.contributor.other | Pontificia Universidad Católica de Chile. Facultad de Ciencias Biológicas | |
| dc.date.accessioned | 2021-05-20T14:57:08Z | |
| dc.date.available | 2021-05-20T10:57:00Z | |
| dc.date.issued | 2021 | |
| dc.date.updated | 2021-05-18T23:30:59Z | |
| dc.description | Tesis (Doctor in Biological Sciences with a mention in Physiology)--Pontificia Universidad Católica de Chile, 2021 | |
| dc.description.abstract | Las inmunoterapias con anticuerpos bloqueadores de proteínas inmuno-reguladoras o ‘immune checkpoints’ han revolucionado el tratamiento del cáncer gástrico (GC), particularmente los anticuerpos contra el receptor PD-1. Sin embargo, la presencia de un microambiente inmunosupresor y la redundancia entre proteínas inmuno-reguladoras podría ser responsable por el alto porcentaje de pacientes que no presenta un beneficio clínico. Una proteína imuno-reguladora emergente es el receptor Tim-3, una proteína de membrana capaz de promover inmunosupresión. A pesar de que este receptor ha adquirido recientemente relevancia en el campo de la inmuno-oncología, la expresión y rol de su ligando Galectina-9 (Gal-9) en GC aún no han sido determinados. Se evaluó el patrón de expresión de Tim-3 y Gal-9 en el transcriptoma adenocarcinomas gástricos de la base de datos TCGA mediante análisis bioinformáticos (TIMER©, Cibersort y Xcell). Para evaluar el rol de Gal-9 en células de cáncer se transfectaron líneas celulares AGS y GES-1 y se evaluó el efecto de Gal-9 sobre su viabilidad, migración, invasión y expresión de proteínas inmuno-reguladoras. También se utilizó Gal-9 recombinante (rhGal-9) para tratar células endoteliales de cordón umbilical humanas (HUVEC) y evaluar su efecto sobre la capacidad angiogénica de estas células. Finalmente se evaluó el efecto de rhGal-9 sobre cultivos primarios de linfocitos T en presencia o ausencia de anticuerpos bloqueantes de los receptores inmuno-reguladoras PD-1 y Tim-3. Se evaluó la frecuencia de las poblaciones de células CD8+ disfuncionales y de células T reguladoras (Treg). Los análisis de la base de datos TCGA demostraron que los niveles de mRNA de Gal-9 y Tim-3 están aumentados en STAD en relación a tejido gástrico sano. Los niveles de Tim-3 también presentaron un incremento significativo en STAD invasivos. También se observó que Gal-9 y Tim-3 presentan una correlación con otras proteínas inmuno-reguladoras como PDL-1 (el ligando de PD-1), resultado que fue posteriormente confirmado por nuestros experimentos in vitro donde la transfección de Gal-9 aumentó la expresión de su receptor Tim-3 y de PDL-1 en células de GC. Consistente con el aumento de los niveles de Tim-3 en tumores avanzados, Gal-9 incrementó la migración e invasión de las células AGS y GES-1, así como también la migración y angiogénesis in vitro en HUVEC. También a través de análisis bioinformáticos observamos una fuerte correlación positiva entre los niveles de Gal-9 y la firma molecular de células CD8+ disfuncionales y Treg infiltrantes de tumores, sugiriendo que Gal-9 podría tener un rol en el aumento de la disfunción de células CD8+ y en la expansión de Treg en el tumor. A través de experimentos in vitro, observamos que tanto rhGal9 como células de cáncer transfectadas con Gal-9 aumentan la frecuencia de las poblaciones disfuncionales PD1+ Tim-3+ y PD1+ Tim-3+ LAG3+ , así como de la frecuencia de Treg de manera Tim-3 dependiente. Estos resultados sugieren una asociación entre la vía de Gal-9/Tim-3 y tumores más agresivos con un microambiente más inmunosupresor. Dado que la disfunción de células T ha sido asociada a la resistencia a inmunoterapia, evaluamos si es que Gal-9 pudiera ejercer efectos similares en presencia de un anticuerpo αPD1. Como era esperado, el αPD1 disminuyó las poblaciones disfuncionales, sin embargo no en presencia de rhGal-9. Esto indica que Gal-9 puede promover el fenotipo disfuncional a pesar del bloqueo de PD1, lo cual apoya el uso de estrategias combinatorias utilizando bloqueadores de PD1 y Tim-3 en la clínica. Debido a que Gal-9 es una proteína secretada y detectable en plasma, proponemos que sus niveles plasmáticos podrían servir como un biomarcador para la inmunoterapia combinada (αPD1 + αTim3). Más aún, un aumento en los niveles circulantes de Gal-9 en pacientes recibiendo la monoterapia con αPD1 podría indicar mayor probabilidad de resistencia adquirida y momento para iniciar la terapia combinada | |
| dc.description.version | 2022-06-03 | |
| dc.format.extent | 99 páginas | |
| dc.fuente.origen | Autoarchivo | |
| dc.identifier.doi | 10.7764/tesisUC/BIO/58550 | |
| dc.identifier.uri | https://doi.org/10.7764/tesisUC/BIO/58550 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.uc.cl/handle/11534/58550 | |
| dc.information.autoruc | Facultad de Ciencias Biológicas ; Owen, Gareth Ivor ; 0000-0003-3807-6054 ; 1000459 | |
| dc.information.autoruc | Facultad de Ciencias Biológicas ; Hill Machado, Charlotte Nicole ; S/I ; 186997 | |
| dc.language.iso | en | |
| dc.nota.acceso | Contenido completo | |
| dc.rights | acceso abierto | |
| dc.subject.ddc | 616.99433 | |
| dc.subject.dewey | Medicina y salud | es_ES |
| dc.subject.other | Cáncer gástrico | es_ES |
| dc.subject.other | Galectina 9 | es_ES |
| dc.title | Galectin-9 promotes an immune-suppresive microenvironment in gastric cancer | es_ES |
| dc.type | tesis doctoral | |
| sipa.codpersvinculados | 1000459 | |
| sipa.codpersvinculados | 186997 |