Browsing by Author "Tapia Ossa, Pablo José"

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    A performance analysis of the presence of malignant circulating prostate cells as a predictive factor for the detection of prostate cancer in the first, second and third prostatic biopsy
    (2013) Murray, Nigel P.; Reyes, Eduardo; Tapia Ossa, Pablo José; Badinez, Leo; Orellana, N.; Fuentealba, Cynthia; Olivares Donoso, Ruby Carolina; Dueñas, R.
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    Absence of AGPAT2 impairs brown adipogenesis, increases IFN stimulated gene expression and alters mitochondrial morphology
    (2020) Tapia Ossa, Pablo José; Figueroa Toledo, Ana María; Eisner Sagüés, Verónica Raquel; González Hódar, Lila Alejandra; Robledo Plaza, Fermín Alberto; Agarwal, AK; Garg, A.; Cortés Mora, Víctor Antonio
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    AGPAT2 is essential for postnatal development and maintenance of white and brown adipose tissue
    (2016) Cautivo Reyes, Kelly Margarita; Lizama, Carlos O.; Tapia Ossa, Pablo José; Agarwal, Anil K.; Garg, Abhimanyu; Horton, Jay D.; Cortés Mora, Víctor Antonio
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    c-Abl Inhibition Activates TFEB and Promotes Cellular Clearance in a Lysosomal Disorder
    (2020) Contreras, P. S.; Tapia Ossa, Pablo José; González Hódar, Lila Alejandra; Peluso, I.; Soldati, C.; Valls Jiménez, Cristián; Balboa Castillo, Elisa Ivana; Castro Alonso, Juan Cristóbal; Leal Reyes, Nancy Valeria; Zanlungo Matsuhiro, Silvana; Napolitano, G.; Matarese, M.; Heras, M. L.; Martinez, A.; Platt, F. M.; Sobota, A.; Winter, D.; Klein, A. D.; Medina, D. L.; Ballabio, A.; Alvarez, A. R.
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    Genistein Activates Transcription Factor EB and Corrects Niemann–Pick C Phenotype
    (2021) Argüello Florencio, Graciela Rosalva; Balboa Castillo, Elisa; Tapia Ossa, Pablo José; Castro Alonso, Juan Cristóbal; Yañez Henríquez, María José; Mattar, Pamela; Pulgar, Rodrigo; Zanlungo Matsuhiro, Silvana
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    Impairment of exogenous lactate clearance in experimental hyperdynamic septic shock is not related to total liver hypoperfusion
    (2014) Tapia Ossa, Pablo José; Soto, Dagoberto; Bruhn, Alejandro; Alegría, Leyla; Jarufe Cassis, Nicolás; Kattan Tala, Eduardo José; Regueira Heskia, Tomás; Meissner, Arturo; Menchaca, Rodrigo; Vives, María Ignacia
    Introduction: Although the prognostic value of persistent hyperlactatemia in septic shock is unequivocal, its physiological determinants are controversial. Particularly, the role of impaired hepatic clearance has been underestimated and is only considered relevant in patients with liver ischemia or cirrhosis. Our objectives were to establish whether endotoxemia impairs whole body net lactate clearance, and to explore a potential role for total liver hypoperfusion during the early phase of septic shock.Methods: After anesthesia, 12 sheep were subjected to hemodynamic/perfusion monitoring including hepatic and portal catheterization, and a hepatic ultrasound flow probe. After stabilization (point A), sheep were alternatively assigned to lipopolysaccharide (LPS) (5 mcg/kg bolus followed by 4 mcg/kg/h) or sham for a three-hour study period. After 60 minutes of shock, animals were fluid resuscitated to normalize mean arterial pressure. Repeated series of measurements were performed immediately after fluid resuscitation (point B), and one (point C) and two hours later (point D). Monitoring included systemic and regional hemodynamics, blood gases and lactate measurements, and ex-vivo hepatic mitochondrial respiration at point D. Parallel exogenous lactate and sorbitol clearances were performed at points B and D. Both groups included an intravenous bolus followed by serial blood sampling to draw a curve using the least squares method.Results: Significant hyperlactatemia was already present in LPS as compared to sham animals at point B (4.7 (3.1 to 6.7) versus 1.8 (1.5 to 3.7) mmol/L), increasing to 10.2 (7.8 to 12.3) mmol/L at point D. A significant increase in portal and hepatic lactate levels in LPS animals was also observed. No within-group difference in hepatic DO2, VO2 or O2 extraction, total hepatic blood flow (point D: 915 (773 to 1,046) versus 655 (593 to 1,175) ml/min), mitochondrial respiration, liver enzymes or sorbitol clearance was found. However, there was a highly significant decrease in lactate clearance in LPS animals (point B: 46 (30 to 180) versus 1,212 (743 to 2,116) ml/min, P <0.01; point D: 113 (65 to 322) versus 944 (363 to 1,235) ml/min, P <0.01).Conclusions: Endotoxemia induces an early and severe impairment in lactate clearance that is not related to total liver hypoperfusion.
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    Mechanisms involved in the loss of brown adipose tissue in the AGPAT2 deficient mouse.
    (2019) Tapia Ossa, Pablo José; Cortés Mora, Víctor Antonio; Pontificia Universidad Católica de Chile. Facultad de Ciencias Biológicas
    1-acilglicerol-3-fosfato O-aciltransferasa-2 (AGPAT2) es una enzima que participa en la síntesis de triacilgliceroles y glicerofosfolípidos. En la diferenciación de adipocitos (adipogénesis) el almacenamiento de lípidos en gotas lipídicas de los adipocitos tiene un rol fundamental. Mutaciones en el gen codificante para esta enzima generan lipodistrofia congénita generalizada, enfermedad caracterizada por la reducción severa de tejido adiposo blanco y pardo, así como también severas complicaciones metabólicas. Los ratones deficientes para AGPAT2 (Agpat2-/-) nacen con tejido adiposo pardo de morfología y abundancia similar al de ratones normales, sin embargo, este tejido degenera completamente durante los primeros 6 días después de nacer. Las causas de este fenómeno son actualmente desconocidas. La hipótesis de esta tesis es que adipocitos pardos de ratones Agpat2-/- tienen anormalidades transcripcionales que determinan adipogénesis defectuosa y mayor susceptibilidad a muerte celular lipotóxica. Para evaluar esta hipótesis, preadipocitos pardos del tejido adiposo interescapular de ratones Agpat2-/- y tipo silvestre fueron diferenciados adipogénicamente en cultivo celular y comparados en diversos parámetros morfológicos y moleculares. Los cultivos de preadipocitos diferenciados Agpat2-/- presentaron una menor proporción de células cargadas con gotas lipídicas a lo largo de la diferenciación y una expresión disminuida de los reguladores transcripcionales pro-adipogénicos PPARy, PPARα, C/EBPα y PGC1α. Importantemente, los factores de transcripción PRDM16 y C/EBPβ, previamente identificados como mediadores de la diferenciación adipogénica parda, tuvieron niveles normales en los adipocitos pardos Agpat2- /- diferenciados in vitro. Concordantemente, la proteína UCP1, un marcador específico de adipocito pardo maduro, permaneció indetectable en los adipocitos Agpat2-/- diferenciados. Por el contrario, sus niveles fueron fuertemente inducidos en los adipocitos pardos tipo silvestre diferenciados in vitro. El análisis ultraestructural de los adipocitos diferenciados mostró que las mitocondrias de los adipocitos Agpat2-/- diferenciados pardos tienen morfología notoriamente alterada, con crestas de geometría irregular, y una menor asociación física con gotas lipídicas, a diferencia de lo que ocurre en los adipocitos pardos normales diferenciados, que tienen mitocondrias con crestas plegadas en disposición paralela y que están íntimamente asociadas a gotas lipídicas con alta frecuencia. El análisis global del transcriptoma de los adipocitos diferenciados in vitro mostró divergencia significativa en la abundancia del mRNA codificado por varios grupos de genes. Entre estas destacaron, menor expresión de genes relacionados a la acumulación de lípidos y estructura y función mitocondrial, y mayor expresión de genes estimulados por interferón. Estos resultados fueron verificados independientemente por análisis de qRT-PCR. Adicionalmente, los cultivos de adipocitos Agpat2-/- diferenciados presentan menores niveles de Elovl3 y mitoNEET, ambos previamente identificados como reguladores de la diferenciación y función adiposa. Importantemente, la sobreexpresión de estas proteínas por medio de vectores adenovirales, no normalizó la acumulación de gotas lipídicas en adipocitos Agpat2-/- diferenciados, indicando que la diferenciación adipogénica defectuosa dependiente de la carencia de AGPAT2 no es revertida por estos productos génicos. Finalmente, para evaluar la mayor susceptibilidad a muerte celular por lipotoxicidad en adipocitos pardos Agpat2-/-, primero se cuantificó la concentración y composición de ácidos grasos en el plasma de ratones Agpat2-/- recién nacidos en comparación con ratones tipo silvestre de la misma edad, mostrando una elevación marcada de todas las clases de ácidos grasos, en particular saturados y monoinsaturados, a partir del segundo día postnatal. Entre los primeros destacó el ácido palmítico, cuya concentración fue ~5 veces mayor en los ratones Agpat2-/- recién nacidos en comparación con el tipo silvestre. La incubación de preadipocitos no diferenciados Agpat2-/- y tipo silvestre con ácido palmítico, mostró similares niveles de muerte celular causada por lipotoxicidad. Sin embargo, cuando adipocitos pardos diferenciados in vitro fueron expuestos a ácido palmítico, los cultivos Agpat2-/- presentaron niveles de muerte celular significativamente mayores, cuantificada por cuatro técnicas distintas y complementarias, en comparación con el tipo silvestre, indicado que la carencia de AGPAT2 determina mayor susceptibilidad de los adipocitos a muerte por lipotoxicidad. Tomados en su conjunto, los resultados de esta tesis indican que AGPAT2 es esencial para la diferenciación adiposa parda, determinando perfiles transcripcionales anormales y que los adipocitos diferenciados carentes de esta enzima son más sensibles a altos niveles de ácidos grasos saturados presentes en los ratones Agpat2-/- después de nacer.